口臭的诊断方法及其应用
口臭的诊断方法及其应用
口臭越来越受到人们的重视，特别是青年人群。口臭成为除龋病和牙周病以外临床主诉最多的疾病。在日本采用挥发性硫化物（Volatile Sulfide Compounds VSC）监测仪检测2600个个体，超过20%的人患有口臭。巴西的学者通过调查“告密者”了解其家人是否患有口臭，有15%的家庭成员被指出有口臭。
根据不同的病因，分为真性口臭、假性口臭和口臭恐惧症。真性口臭分为生理性口臭、病理性口臭和其他因素口臭。病理性口臭包括口源性口臭和非口源性口臭，其中口源性口臭占80%～90%。口臭的病因复杂多样，准确诊断是治疗口臭的关键。目前，国内外使用的口臭诊断方法多种多样，常用的口臭诊断方法如下：
1.问卷调查法
问卷调查法是利用调查问卷调查人群口臭患病率，针对提出的问题，被调查者根据自身情况给出合适的答案。此方法实施简单，耗人力物力少，常用于流行病学调查，能得到满意的结果。此外，问卷还可以调查患者的心理倾向。但问卷调查法没有客观评价的标准，完全依靠被调查者自我感知能力以及他人的评价，容易导致结果产生偏差。瑞士学者调查了419个个体，问卷调查显示32%的个体偶尔或经常感到口臭，而鼻闻法分值仅48个个体大于或等于3，挥发性硫化物（Volatile Sulfide Compounds VSC）监测仪检测仅28%的个体大于或等于75ppb。
2.感官分析法
感官分析法是利用人体器官———鼻子的嗅觉来评价口臭气体的强度，是最直接的评价口臭的方法，也被认为是“金标准”。目前国内外应用最广泛的鼻闻法评分标准为Roseberg提出的0～5分制评分标准。鼻闻法评价口臭时，临床医生经常采用全口气味法。美国牙科协会（American Dental Association ADA）在2001年口臭诊断及治疗大会指出，受试者在离检查者鼻部250px的距离处缓缓呼气，检查者对此气味进行评分，用以评估全口气味。对于全口气味的检测，又有不同的方法。Jensdottir等研究了4种检测全口气味的方法的差别，分别为张嘴法，数数法，“哈-哈-哈”法和塑料管法。结果表明塑料管法得出的平均值高，并且检查者之间差异低。因此，认为塑料管法是鼻闻法检测口臭最好的方法。塑料管法由Murata等发明，采用一个直径24mm、长250px的导管插入受试者口中，检查者在屏风后的另一头对气体进行评估。此法即避免了受试者与检查者面对面的尴尬，又保证了气体不被空气稀释，保留了气体浓度。鼻闻法是检测口臭最直接的方法，但由于不同个体甚至是同一个体在不同状态下嗅觉敏感度有所差异，必需对辩嗅员进行培训，达到统一标准。
Nachnani等利用4种不愉快气体和3种愉快气体的20个不同强度的样本，对4名有经验的口臭检测员以及2名没有经验的检测员进行培训。结果证明通过培训，检测者们不管是否之前有经验，都提高了评估气体强度的能力。
3.仪器分析法
3.1气象色谱法
配备有火焰光度检测仪的气象色谱仪（GC-FPD）是一种大型精密仪器。由于其精确度，也有人认为气象色谱法是检测口臭的“金标准”。由于仪器体积比较大，无法配备在椅旁，需将患者呼出的样本气体收集并经物理降温浓缩移送实验室，然后将气体样本，进行色谱分析。GC-FPD有比较宽的物质分析域，并且样本浓度很低的情况下也能检测，数据精确。除挥发性硫化物外，还能检测一些异味的物质，如尸胺，腐胺等。另外，GCFPD还能分辨出口外来源的异味。但由于仪器不便移动携带，消耗人力物力大等因素，气象色谱法仅可作为实验室研究。
3.2便携式气象色谱仪
便携式气象色谱仪（简称GC-SCS，商品名Oral Chroma TM）是一种小型轻巧方便携带的口臭检测仪，可对3种主要口臭气体硫化氢、甲硫醇和二甲基硫醚分离进行浓度检测，其适合用于临床椅旁诊断及科研分析。便携式气象色谱仪只能检测静止的气体，需要进行气体转移。GC-SCS对检测VSCs具有很高的灵敏性，与GC-FPD一样，能区别口内来源及口外来源的口臭。Vandekerckhove等证实便携式气象色谱仪与鼻闻法有显著相关性（R=0.66），并且以鼻闻法为标准，其检测口臭和非口臭的敏感性及特异性分别为69%和100%。此外，Murata等采用GC-FPD所测得的3种VSCs的含量与便携式气象色谱仪所检测到的相关性分别为0.82、0.87、0.77。在不具备GC-FPD的情况下，便携式气象色谱仪所得数据也具有一定可靠性。
3.3便携式硫化物检测仪
便携式硫化物检测仪（商品名Halimeter）是目前市场上常见的口臭检测仪。便携式硫化物检测仪可检测流动的气体，不需要采集、移送样本，常用于椅旁诊断。该检测仪只能对口腔中几种主要的挥发性硫化物进行综合评价，得出其总量，而不能鉴别其种类。Vandekerckhove等研究显示鼻闻法与便携式硫化物检测仪之间有显著相关性（R=0.74），以鼻闻法为标准，其检测口臭和非口臭的敏感性和特异性分别为63%和98%。此外，Baharvand等的研究显示便携式硫化物检测仪与感官分析法之间Kendall系数为0.493，敏感性和特异性分别为61.1%和87.8%，阳性预测值为81.5%，阴性预测值为72%。
4.生物分析法
4.1细菌培养法
细菌培养法是对口腔细菌采样，通过细菌培养来分析细菌的性质和数量，直观的反映口腔内细菌构成比例。但Kazor等利用补充了人血和唾液的培养介质仅得到30%的细菌，口腔内大部分细菌还不能在培养基上生长，而且生长出的细菌部分不能被鉴定。细菌培养法对于口腔微生物的鉴定具有很大的局限性。
4.2甲酰基精氨酸萘酰胺水解试验（BANA）
牙龈卟啉菌（Porphyromorts gingivalis，Pg）、齿密螺旋体（Treponema denticola，Td）及福赛氏类杆菌（Bacterioides forsythus，Bf）等关键牙周病致病微生物被证实与口臭有关。利用它们产生的胰蛋白酶样酶（Trypsin like enzyme TLE）使人工合成的酶底物———BANA水解的原理，可快速检测以上细菌是否存在，判断有无口臭。
4.3分子生物学方法
最常用的为16srRNA克隆技术。16srRNA为各类细胞生物所共有的核糖体序列，含有保守序列和可变序列，通过分析细菌的16srRNA序列，构建微生物的种系进化树，准确全面的表现菌落群中细菌的组成和比例。王菁等采集7名口臭患者和4名健康者舌苔标本，使用通用引物扩增标本中所有细菌的16srRNA片段，测序分析并构建舌背微生物的种系进化树，结果其中17种已知细菌只在口臭患者舌苔上检出，证实口臭组舌背菌群的生物多样性高于非口臭组。利用分子生物学方法检测到的细菌群落具有多样性及精确性。但此方法需花费大量人力、物力和财力，仅适合于小样本的分析。
5.氨性口臭检测方法
除配备有火焰光度检测仪的气象色谱仪外，便携式气象色谱仪和便携式硫化物检测仪均只能检测口臭气体中的几种主要挥发性硫化气体，对于氨性气体敏感性不高。对于氨性口臭需要辅助特殊的诊断方法，主要有以下检测方法：
5.1 14碳尿素呼吸试验仪
14碳尿素呼吸试验仪（商品名HeliprobeTM）是用来检测与口臭相关的幽门螺杆菌感染的仪器，可用以检测氨性口臭。研究显示鼻闻法和14碳尿素呼吸试验仪测量的结果呈显著性相关（r=0.911），该测量法能准确表达氨性口臭的程度，可对氨性口臭的诊断和治疗提供可靠的依据。
5.2茚三酮法
茚三酮法是利用显色剂抗坏血酸与茚三酮发生反应，使茚三酮变成还原性茚三酮，继而与氨反应生成有色化合物，测量其吸光度。该吸光度值与氨含量在一定范围内成正比，将吸光度值转换为氨含量，从而判断口臭的程度。有学者使用茚三酮法检测健康人群及口臭人群的唾液以及口气，结果均显示两组人群氨的含量有区别，且与鼻闻法呈正相关。另外，Dadamio等根据此方法建立了一种简便的椅旁诊断方法，将反应生成的不同浓度有色化合物的颜色显示在一张比色卡上，检测结果与鼻闻法分值、通过Oral Chroma TM检测的VSCs水平、用光谱气相色谱仪检测的氨含量相比较，均有较高的相关性（R=0.46～0.77）。
综上所述，口臭的诊断方法各有其优缺点，研究者可根据不同的需要选择不同的方法，推荐两种或两种以上方法联合使用。
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